在医疗器械、制药和食品等高洁净要求行业中，微生物计数是一项关键的质量控制手段。无论是洁净室环境监测、产品放行检测，还是工艺验证，准确的微生物数量评估都直接关系到产品的安全性和合规性。

一、什么是微生物计数？

微生物计数是指对样品中细菌、真菌、酵母菌等微生物群落数量的检测和评估。根据产品种类和行业要求，微生物计数可分为：

总菌落计数（TAMC）

霉菌和酵母菌计数（TYMC）

特定微生物检测（如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等）

二、常用的微生物计数方法

1. 平皿涂布法 / 平皿倾注法

适用于微生物总数不高的样品，将待测液稀释后涂布或倒入培养基中，培养48小时后进行菌落计数。适合非抑菌产品，如常规制剂、水样。

2. 膜过滤法

用于微生物数量较少或含有抑菌成分的样品（如注射液）。通过0.45μm滤膜过滤后将滤膜置于培养基上培养，可显著提高灵敏度。

3. 最可能数法（MPN）

用于水质或低浓度样品的估计计数，属于概率法，尤其适用于饮用水、注射用水等微生物限度检测。

4. 空气微生物采样法

洁净室等洁净环境中多采用撞击式空气采样器或沉降法，检测空气中浮游菌数量，是洁净室等级评定的核心项目之一。

三、影响微生物计数准确性的因素

1.培养条件控制不当
温度、时间、pH、湿度等都会直接影响微生物的生长。

2.样品稀释或处理不当
稀释倍数过高或混匀不充分，会导致计数失真。

3.操作者误差
手动计数时需避免重复计数或遗漏。

4.培养基污染
培养基应符合药典标准，避免杂菌干扰实验结果。

四、法规与标准要求

微生物计数通常应符合以下法规/标准要求：

中国药典（ChP）2020版

USP <61>/<62> 微生物限度检查

ISO 11737（医疗器械生物学评估）

GMP及洁净区运行规范

五、行业应用举例

医疗器械：无菌器械需通过生物负载检测、灭菌验证中进行微生物限度检测。

制药企业：口服固体制剂、注射剂、滴眼液等产品出厂前需确保微生物总数在可控范围内。

食品行业：原材料、生产环境和成品均需定期进行微生物计数。

随着监管要求日趋严格，企业需建立标准化的微生物检测流程，并配备专业实验人员和设备，确保产品质量与市场合规。未来，快速微生物检测方法（如ATP生物发光、qPCR等）也将在行业中发挥更大作用。